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使用非损伤微测技术进行虹鳟鱼卵母细胞Rh糖蛋白功能的研究
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| 图注：用非损伤微测技术测定H2O2,Rhag-,Rhcg2-和Rh30-like注射进卵母细胞后对NH4+的吸收以及NH4+吸收的动力学。 |
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胺跨膜的转运是维持生物体氮代谢和氮平衡的关键因素。虹鳟鱼腮的胺转运可能通过Rh糖蛋白调节。
2010年，加拿大的科学家使用非损伤微测技术研究了虹鳟鱼不同的Rh糖蛋白（R Rhag, Rhbg1, Rhbg2, Rhcg1, Rhcg2, Rh30-like）在卵母细胞中表达后的胺转运。除Rh30-like外，其他的Rh蛋白都能够促进甲胺的吸收，吸收可达到饱和，Km值在 4.6-8.9mM。胞外的pH值从7.5升高到8.5，导致甲胺的最大流速（Jmax）增加了3-4倍。当糖蛋白全部表达或者质子化甲胺时Km值没有变化。pH梯度刺激甲胺外流和内流的比率和H+梯度的增加成正相关。
本研究使用非损伤微测技术证实了Rhag和Rhcg2促进胺的吸收，但是Rh30-like蛋白不能促进吸收。在低底物浓度下，胺的吸收速率比甲胺高。胺的Km值在虹鳟鱼的生理范围之内。
这项研究发现虹鳟鱼腮的Rh糖蛋白具有低亲和力，以及高的胺转运能力形成的pH梯度，当胞浆胺浓度升高的时候，促进了胺的快速外流。这项研究为我们认识胺的转运提供了直接的证据，非损伤微测技术能够直接测定活体的NH4+以及NO3-的流速，对于研究氮的转运，研究蛋白的功能有很大的意义。
关键词：胺转运，Rh糖蛋白，卵母细胞，虹鳟鱼，非损伤微测技术
参考文献：Nawata CM, et al. Journal of Experimental Biology, 2010: 213, 1049-1059.