主题： 如何平衡与固定样品

从文献中了解到样品测试前还需要进行平衡与固定，但是文献中没有详细的步骤，请问，如何对样品进行平衡与固定？

1. 选择适合样品大小的培养皿；一般情况下，拟南芥、分离下来的根用小皿（35mm）的情况较多，若根系较长或植株较大，则考虑用中皿（60mm）甚至大皿（100mm）；

2. 准备平衡辅助物品；取树脂块放于培养皿中，先用高纯水进行清洗，再用测试液进行润洗，最后更换新的测试液进行平衡；根据所需皿的大小剪裁滤纸，长度略短于皿直径，宽度在5mm 左右，剪裁好之后，盛放在培养皿中（可与树脂块放在一个皿中），用测试液浸泡，进行平衡；

3. 平衡样品；将样品放在合适的培养皿里，倒上测试液，按下计时器计时（时长参考实验方案），平衡期间可用毛笔轻刷待测部位，将培养基及其它杂质清洗干净；到达时间后平衡完成，随后便可开始固定样品。平衡结束时可取用一次性滴管吸掉。为方便观察效果，可以取黑垫纸放在培养皿下方；

4. 固定样品；用小镊子夹一张滤纸条，放在皿底中间靠边的位置，然后将样品垂直放在滤纸上，为了方便测试，请尽量将待测部位留在皿中间，再放一个滤纸条压在上面，最后在样品的两端压上树脂块，树脂块边缘最好与两层滤纸边缘平齐，以方便电极尖端测试样品。添加测试液，使其没过样品及皿底，即可递交给工程师进行测试。

对于动物细胞用多聚赖氨酸玻片固定
1. 取一个干净的培养皿，用移液枪在皿底中间位置滴一滴测试液，然后用镊子夹住一片玻片轻轻压在培养皿底部，防止之后大量加入测试液后玻片漂起来。
2. 用移液枪吸取一定量的样品溶液（具体量依样品而定，一般为100uL-200uL），滴到玻片中间位置，然后静置3-5min，使样品能充分被玻片吸附住。
3. 用移液枪吸取一定量测试液，沿培养皿边缘缓慢加入，同时用镊子轻轻压住玻片边缘，防止玻片漂起来，加入的测试液必须完全没过玻片。
4. 用移液枪（或吸管）将皿中测试液吸出（将漂浮的细胞冲掉），然后再加入测试液就可以进行测试了。

不只是动物细胞，一些小样品如花粉管、植物液泡、悬浮细胞等都可以采用多聚赖氨酸玻片进行测试样品的固定。
操作方法如上述所示，1、2——取样进行样品固定，3——进行样品平衡，4——平衡好后更换新的测试液即可上机进行检测。

样品平衡的时间怎么确定？平衡使用的溶液必须是测试液吗？

样品的平衡时间一般为10-30分钟，时间的长短主要是根据样品的不同以及测试部位的不同而存在区别。

具体您的样品需要较长的平衡时间还是短时间即可，需要根据样品平衡之后是否可以上机测试得到稳定数据来确定。