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【成果回顾】MP西农：NMT发现Ca2+流在H2S调控ABA信号通路研究中充当关键生理证据
转自中关村旭月非损伤微测技术产业联盟
基本信息
主题：NMT发现Ca2+流在H2S调控ABA信号通路研究中充当关键生理证据
期刊：Molecular Plant
影响因子：10.812（2019年）
研究使用平台：NMT水旱胁迫创新平台
标题：Hydrogen Sulfide Positively Regulates Abscisic Acid Signaling through Persulfidation of SnRK2.6 in Guard Cells
作者：西北农林科技大学李积胜、陈思思、王晓峰，陕西科技大学贾红磊
检测离子/分子指标
Ca2+
检测样品
拟南芥保卫细胞
中文摘要（谷歌机翻）
植物激素脱落酸（ABA）在触发气孔关闭和提高植物对干旱胁迫的适应性方面起着关键作用。硫化氢（H2S）是一种气体信号分子，参与ABA依赖性气孔关闭。然而，H2S如何调控ABA信号转导仍不清楚。研究表明，ABA诱导DES1在保卫细胞中催化H2S的产生，而H2S则通过OST1/SnRK2的硫巯基化（persulfidation）来正向调节ABA信号传导。暴露在SnRK2.6表面并靠近激活环的两个半胱氨酸位点（Cys131和Cys137）被硫巯基化，从而促进SnRK2.6的活性以及和ABF2（ABA信号下游的转录因子）的相互作用。当SnRK2.6中的Cys131、Cys137或两者都被丝氨酸取代时，H2S诱导的SnRK2.6活性和SnRK2.6-ABF2相互作用部分(SnRK2.6C131Sand SnRK2.6C137S)或完全(SnRK2.6C131SC137S)组成。在ost1-3突变体中引入SnRK2.6C131S、SnRK2.6C137S、或SnRK2.6C131SC137S不能改变突变体的表型，它们对ABA和H2S诱导的气孔关闭和Ca2+内流不敏感，导致失水增加和抗旱能力下降。综上所述，本研究揭示了一种新的ABA信号转导的翻译后调控机制，其中H2S硫巯基化SnRK2.6促进ABA信号转导和ABA诱导的气孔关闭。
离子/分子流实验处理
5周龄拟南芥幼苗，10 μM ABA/100 μM NaHS实时处理。
离子/分子流实验结果
Ca2+信号是气孔运动的重要调节因子，并在SnRK2.6的下游调节ABA依赖性气孔闭合。因此，本研究分析了保卫细胞的瞬时Ca2+流速。如图1A所示，施加10 μM ABA会引起WT保卫细胞中显著的Ca2+跨膜内流，在ABA处理后20 s到40 s出现Ca2+内流高峰，然后迅速恢复到稳态。在ost1-3保卫细胞中，ABA不会显著影响Ca2+的流速（图1B）。ost1-3/2.6WT完全补充了ABA诱导的ost1-3的Ca2+内流（图1C）。但是，ost1-3/2.6C131S，ost1-3/2.6C137S和ost1-3/2.6C131SC137S对ABA诱导的Ca2+内流的敏感性降低了（图1D-F）。此外，des1对ABA诱导的Ca2+内流的敏感性也降低了（图1G）。通过计算Ca2+内流速率的平均值发现，WT和ost1-3/2.6WT的值最大，并且在des1、ost1-3/2.6C131S、ost1-3/2.6C137S和ost1-3/2.6C131SC137S中的值依次降低（图1H）。NaHS处理还引起WT保卫细胞的瞬时Ca2+内流（图1I）。NaHS诱导的Ca2+内流峰值比ABA诱导的内流峰值弱，但持续时间更长（图1I-P）。ost1-3和ost1-3/2.6C131SC137S对NaHS不敏感（图1J, N, P）。ost1-3/2.6WT补充了NaHS诱导的ost1-3的Ca2+流入（图1K）。ost1-3/2.6C131S，ost1-3/2.6C137S和des1，对NaHS诱导的Ca2+内流的敏感性降低（图1L, M, O）。
图1. 保卫细胞Ca2+净流速测定。负值代表Ca2+吸收。
测试液
0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0
仪器采购信息
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据中关村NMT产业联盟了解，陕西地区的西北农林科技大学于2019年采购了美国扬格公司的非损伤微测系统
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据中关村NMT产业联盟了解，陕西地区的陕西科技大学于2019年采购了旭月（北京）科技有限公司的非损伤微测系统。
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.molp.2020.01.004
关键词：非损伤微测技术；Ca2+流；拟南芥；植物生长发育
