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干旱胁迫研究NMT标准化方案｜中关村认证实验标准
H+流是如何贯穿水、肥两个方向成为研究核心思想的
瞬时干旱胁迫下水稻根部钙离子流速变化丨NMT实验奇想第13期
干旱胁迫对植物铵吸收会产生怎样的影响
1）Zhao C et al. Evolution of chloroplast retrograde signaling facilitates green plant adaptation to land. PNAS. 2019. 116 (11) 5015-5020.
2）Feng X et al. HvAKT2 and HvHAK1 confer drought tolerance in barley through enhanced leaf mesophyll H+ homoeostasis. Plant Biotechnol J. 2020. doi: 10.1111/pbi.13332.
3）Zhang X et al. Mesophyll cells’ ability to maintain potassium is correlated with drought tolerance in tea (Camellia sinensis). Plant Physiol Bioch. 2019. 136:196-203.
4）Pan J et al. An S-domain receptor-like kinase, OsESG1, regulates early crown root development and drought resistance in rice. Plant ence, 2019, 290:110318.
5）Yang J et al. Overexpression of TaLEA3 induces rapid stomatal closure under drought stress in Phellodendron amurense Rupr. Plant Science, 2018, 277.
6）Linlin H, et al. Ammonium uptake increases in response to PEG-induced drought stress in Malus hupehensis Rehd. Environmental and Experimental Botany. 2018. 151:32-42
7）Li T, et al. First cloning and characterization of two functional aquaporin genes from an arbuscular mycorrhizal fungus Glomus intraradices. New Phytologist, 2013, 197(2): 617-630.
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K+、Ca2+、H+、Cl-、NO3-、NH4+、IAA、H2O2
1）H2O2生理功能概述
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2）科研案例
诱导植物产生系统获得抗性、高度敏感抗性和热抗性；引起细胞衰老，诱导程序性死亡；参与ABA调控的气孔关闭；参与根的向地性、生长和不定根形成；细胞壁发育的信号分子；参与柱头和花粉粒的发育与相互作用；参与信号转导；调控基因表达。
例1：高温和干旱胁迫下，非损伤微测技术监测到发芽种子胚芽鞘的H2O2外排，结合ROS、丙二醛含量检测，及抗氧化酶活性分析，表明高温和干旱条件下ABA和ROS的积累，可以抑制水稻种子的萌发和生长。
Liu J et al. High temperature and drought stress cause abscisic acid and reactive oxygen species accumulation and suppress seed germination growth in rice. Protoplasma. 2019;256(5):1217-1227.
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1、动物样品
1）细胞
神经细胞、肿瘤细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等
2）组织器官
肿瘤、皮肤、胃粘膜、胰岛、脑（海马体等）、胚胎（大鼠、鱼）、斑马鱼皮肤/鳃、耳蜗、心脏（香螺）、卵（鱼、鸡蛋、爪蟾）、骨骼、角膜、脊椎（豚鼠）、肌肉组织（肌纤维、心肌）
3）其它动物样品
珊瑚、螨虫、昆虫（果蝇幼虫的肠、蟑螂血脑屏障、按蚊、长红锥蝽）、蝌蚪、水蛭、蓝蟹（微感毛）、变形虫、水丝蚓
2、植物样品
1）营养器官
根：根、根毛、根瘤
茎：边材、心材、微管形成层、木质部
叶：表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
2）生殖器官
花：花瓣、花瓣表皮细胞、花粉
种子：整体、胚
果实：果壳、果皮、果肉（苹果、柑橘）、籽粒、棉花纤维、棉桃
3）细胞：植物悬浮细胞、液泡
4）愈伤组织
3、微生物样品
酵母细胞、菌丝、菌落、微藻、细菌（大肠杆菌）
4、其它生物样品
周丛生物
5、非生物样品
金属、混凝土、泥沙、纳米材料、生物医药材料
非损伤微测技术最大的特点就是活体、无损检测，因此动植物材料在检测前，不需要任何的液氮速冻、染色、研磨处理等。
1、动物单细胞
因NMT是活体检测，故从培养箱中拿出来后，置于培养皿中，直接检测即可。
2、动物组织
因NMT是活体检测，无需提前处理。如检测部位天然暴露在外，如斑马鱼皮肤离子细胞、侧线毛细胞，直接检测即可。如检测部位位于体内，需在检测时暴露出检测部位（可采用麻醉的方式），后检测即可。
3、植物根茎叶等组织器官
天然暴露在外的组织器官，例如根、茎、叶的表面，无需任何处理，直接检测即可。水培、土培、砂培、平板培养均可。
4、植物原生质体/液泡
因NMT是基于微传感器/探针的非损伤检测，检测时不接触样品，故原生质体、液泡需要从组织或者细胞中，提取出来后检测。
5、植物叶片的表皮细胞、叶肉细胞、盐腺细胞、保卫细胞
无需提前处理。因这些细胞处于组织内部，故检测时采用撕取等方式，暴露出相应细胞即可。
6、植物花粉管
离体萌发：在培养皿中萌发一段时间后即可直接检测；在体萌发：将柱头置于培养皿中，待萌发一段时间后即可直接检测。
7、植物果实
无需提前处理。如待测部位位于果实内部，需在检测前暴露出相应部位即可。
即瞬时处理，是指在检测过程中，在正常测试液中瞬间加入所需的干旱胁迫溶液（PEG或甘露醇等溶液）的处理方法，目的是为了观察瞬间干旱胁迫下，样品短时间内的离子/分子的变化趋势，即短时效应。
检测时，只要求待测部位浸于溶液中（无需整体都浸在溶液里）。
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可以送样检测。目前非损伤微测技术测试服务由中关村NMT产业联盟统筹管理，由遍布全国的25家NMT创新平台服务中心，提供检测服务。
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关键词：NMT标准化方案、极性生长
