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PJ福建农林许卫锋:NMT发现G蛋白γ亚基、14-3-3均可促低P下水稻泌H+为两者互作调控质子泵从而促根伸长及吸P提供证据

转自中关村旭月非损伤微测技术产业联盟

 

 

 

感谢本文一作,福建农林大学许飞云博士校稿

 

基本信息

主题:NMT发现G蛋白γ亚基、14-3-3均可促低P下水稻泌H+为两者互作调控质子泵从而促根伸长及吸P提供证据

期刊:The Plant Journal

影响因子:6.141

研究使用平台NMT植物营养创新平台

标题:Rice G protein γ subunit qPE9-1 modulates root elongation for phosphorus uptake by involving 14-3-3 protein OsGF14b and plasma membrane H+-ATPase

者:福建农林大学许卫锋、许飞云、王珂

 

检测离子/分子指标

H+

 

检测样品

水稻根

 

中文摘要(谷歌机翻)

      异源三聚体G蛋白参与植物生长发育,而水稻G蛋白γ亚基qPE9-1响应低磷(LP)的作用机制尚不清楚。在LP条件下,qPE9-1基因在水稻根系中的表达明显受到诱导。携带qPE9-1等位基因的水稻品种比携带qpe9-1等位基因的水稻品种(qPE9-1等位基因的突变体)对LP表现出更高的主根响应。在LP条件下,具有qPE9-1等位基因的转基因水稻比具有qpe9-1等位基因的转基因水稻具有更大的主根长度和P浓度。质膜(PM)H+-ATPaseqPE9-1介导的LP响应非常重要。此外,一种14-3-3蛋白OsGF14b,作为激活PM H+-ATPase促进根系伸长的关键成分,也参与了qPE9-1的介导。另外,OsGF14b在WYJ8(携带qpe9-1等位基因)中过表达部分增加了LP条件下的主根长度。使用R18肽(14-3-3 蛋白抑制剂),qPE9-1通过14-3-3蛋白参与LP条件下主根的伸长和H+外排。在LP条件下,干燥土壤中qPE9-1株系的根鞘(rhizosheath)重量、全P含量和根鞘土壤Olsen-P浓度均高于qpe9-1株系。这些结果表明,水稻中的G蛋白γ亚基qPE9-1通过14-3-3蛋白OsGF14b和PM H+-ATPase来调节根系伸长以吸收磷

 

离子/分子流实验处理

1. 300 μM P(对照)处理7 d
2. 300 μM P +30 μM VAN(钒酸盐,一种PM H+-ATPase抑制剂)处理7 d
3. 300 μM P +2 μM FC(壳梭孢菌素,一种PM H+-ATPase刺激剂)处理7 d
4. 2 μM P(LP)处理7 d
5. 2 μM P+30 μM VAN处理7 d
6. 2 μM P+2 μM FC处理7 d
7. 300 μM P +10μg/mL R18肽处理7 d
8. 2 μM P+10 μg/mL R18肽处理7 d

 

离子/分子流实验结果

      使用VAN和FC研究qPE9-1对PM H+-ATPase的影响。LP条件下,qPE9-1回补系和ZH11的H+外排速率增加;然而,在WYJ8和RNAi株系的H+外排速率没有差异。施加FC导致qPE9-1回补系和WYJ8对H+外排速率的响应相似。在有VAN的LP条件下,qPE9-1回补系与WYJ8或ZH11与RNAi株系的H+外排速率没有显著差异(图1)

 

图1. 水稻在300 μM P、300 μM P +30 μM VAN、2 μM P、2 μM P+30 μM VAN、2 μM P+2 μM FC处理7 d后的H+外排速率正值代表H+外排。

 

      为进一步了解qPE9-1介导的H+外排增加是否与OsGF14b相关,使用了14-3-3蛋白抑制剂R18肽(图2)。在LP条件下,qPE9-1回补系的H+外排速率比对照条件下高。然而,当添加R18时,与正常生长(对照条件)相比,LP 条件下 WYJ8 的H+外排速率没有任何显著差异。在具有R18肽的LP下,qPE9-1回补系和WYJ8之间的H+外排速率没有显著差异(图 2C)。还使用了qPE9-1表达减少的株系。类似地,在具有R18肽的 LP 条件下,ZH11和RNAi株系之间的H+外排速率没有显著差异(图 2D)

 

图2. 水稻在300 μM P 、300 μM P +10 μg/mL R18肽、2 μM P 、2 μM P+10 μg/mL R18肽处理7 d后的H+外排速率正值代表H+外排。

 

许卫锋课题组NMT成果回顾

·Sci Adv福建农林应用NMT发现低浓度ABA促进质子分泌是根系响应水分胁迫和向水性的关键机制

·Nature Commun许卫锋/程锋:质子流在白羽扇豆基因组进化和低磷适应研究上的关键作用 | NMT磷营养创新科研平台

 

其他实验结果

  • 携带qPE9-1等位基因的水稻品种在LP下表现出较高的qPE9-1表达水平和较大的主根长度

  • 在WYJ8中回补qPE9-1会增加LP条件下的主根长度和P浓度

  • 在LP条件下,qPE9-1表达减少会降低主根长度和P浓度

  • qPE9-1与OsGF14b(一种14-3-3蛋白,作为激活PM H+-ATPase促进根伸长的关键成分)相互作用并影响OsGF14b在水稻中的表达

  • qPE9-1是LP条件下干燥土壤中根鞘形成和P积累所必需的。

 

结论

      综上所述,水稻G蛋白γ亚基qPE9-1与14-3-3蛋白OsGF14b相互作用可能是通过提高低磷条件下OsGF14b基因在水稻根系中的表达来实现的。其次,OsGF14b增加水稻中PM H+-ATPase的活性,促进H+外排,这对根系伸长和磷吸收非常重要。这些结果增加了对水稻响应低磷的理解

 

测试液

0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0

 

仪器采购信息

据中关村NMT产业联盟了解,福建地区的福建农林大学于2015采购了美国扬格公司公司的非损伤微测系统。

 

 

 

 

原文链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/tpj.15402

 

关键词:G蛋白γ亚基qPE9-1;H+外排;14-3-3蛋白OsGF14b;缺磷;根伸长;水稻